Яка різниця між клонуванням TA та клонуванням TOPO?
2024 0 Comments
Клонування TOPO TA є без обмежень травлення та
лігування
У біохімії лігаза – це фермент, який може каталізувати з'єднання (лігування) двох молекул шляхом утворення нового хімічного зв'язку. Зазвичай це відбувається шляхом гідролізу невеликої підвішеної хімічної групи в одній із молекул, що зазвичай призводить до утворення нових зв’язків C-O, C-S або C-N.
https://en.wikipedia.org › wiki › Лігаза
– безкоштовне клонування. Традиційний метод клонування ТА вимагає етапу лігування для запечатування з’єднань вектора зі вставкою.
Клонування генів, яке створює копії генів або сегментів ДНК. Репродуктивне клонування, яке створює копії цілих тварин.
Техніка клонування TA TOPO базується на здатності аденіну (A) і тиміну (T) (комплементарних пар основ) різних фрагментів ДНК гібридизуватися та, у присутності лігази або топоізомерази, з’єднуватися разом.
Клонування TA (також відоме як швидке клонування або Т-клонування) — це техніка субклонування, яка дозволяє уникнути використання рестриктазних ферментів і є легшою та швидшою, ніж традиційне субклонування.
- • Налаштуйте реакцію клонування TOPO® (змішайте продукт ПЛР і вектор TOPO®)
- • Інкубуйте 5 хвилин при кімнатній температурі. • Трансформуйте реакцію клонування TOPO® у One Shot® Competent Cells або.
- еквівалент. • Виберіть і проаналізуйте 10 білих або світло-блакитних колоній для вставки.
Існує три типи клонування:
- Клонування генів, яке створює копії генів або сегментів ДНК.
- Репродуктивне клонування, яке створює копії цілих тварин.
- Терапевтичне клонування, яке створює ембріональні стовбурові клітини.