Що таке фарбування аннексином V і 7-AAD?
Фарбування аннексином V/7-аміно-актиноміцином зручний спосіб відрізнити ранній апоптоз від пізнього апоптозу та некрозу. Ранні апоптотичні клітини експресують фосфатидилсерини (PS) на зовнішньому листку плазматичної мембрани. PS можна пофарбувати міченим аннексином V.
Кон’югати Анексину V є ефективною міткою для фарбування фосфатидилсеринів (PS), які експресуються на зовнішньому шарі плазматичної мембрани ранніми апоптичними клітинами. З іншого боку, 7-AAD — це мембранонепроникний флуоресцентний барвник, який не здатний досягати ДНК життєздатних клітин.
Кілька різних флуорохромів можна використовувати для фарбування нежиттєздатних клітин, включаючи 7-аміно актиноміцин D (7-AAD). 7-AAD є мембранонепроникний барвник, який зазвичай виключається з життєздатних клітин. Він зв’язується з дволанцюговою ДНК шляхом інтеркаляції між парами основ у багатих G-C областях.
Фарбування Alexa Fluor 488 Annexin V в експерименті з проточною цитометрією. Можна використовувати фарби Анексин V для оцінки потенційних лікарських засобів, що індукують апоптоз, у живих клітинах. Живі клітини, оброблені препаратами, що індукують апоптоз (тобто камптотецином), продемонструють збільшення кількості апоптозних клітин (Малюнок 2, внизу праворуч).
Барвник Caspase-3/7 забарвлює ядра апоптичних клітин, тому легко відрізнити дискретно мічені ядра сусідніх апоптичних клітин. Однак барвники Incucyte® Annexin V маркують всю поверхню клітини. Таким чином, розрізнити сусідні клітини може бути складно.
Фарбування аннексином V/7-аміно-актиноміцином зручний спосіб відрізнити ранній апоптоз від пізнього апоптозу та некрозу. Ранні апоптотичні клітини експресують фосфатидилсерини (PS) на зовнішньому листку плазматичної мембрани. PS можна пофарбувати міченим аннексином V.