Яка концентрація Hoechst?
Hoechst можна використовувати в концентраціях 1-10 мкг/мл у фосфатно-сольовому буфері (PBS) або будь-якому іншому буфері, що не містить миючих засобів, при кімнатній температурі. Найкраща концентрація для фарбування живих клітин Hoechst становить 1 мкг/мл. У цій концентрації цитотоксичність мінімальна, що забезпечує вищу життєздатність пофарбованих живих клітин. 6 травня 2021 р.
1 мкг/мл Ми рекомендуємо використовувати барвники Hoechst при 1 мкг/мл або DAPI при 10 мкг/мл. Примітка: DAPI або Hoechst можна комбінувати з іншими флуоресцентними зондами. Видаліть культуральне середовище з клітин і замініть середовищем, що містить барвник. Інкубуйте клітини при кімнатній температурі або 37°C протягом 5-15 хвилин, потім зніміть зображення.');})();(function(){window.jsl.dh('C_DsZr6ZI9HPwbkP5ZG_mAk__43','
Проміжний базовий розчин Hoechst 33342. Приготуйте розчин Hoechst 33342 у DPBS для кінцевої концентрації 1 мг/мл. Робочий розчин Hoechst 33342 Розведіть проміжний вихідний розчин Hoechst до цільової концентрації для фарбування в DPBS. Типова початкова концентрація для валідаційних експериментів становить 1 мкг/мл.
Властивості барвників ДНК на основі Hoechst. Усі три барвники Hoechst використовуються в подібних цілях, але їхні властивості дещо відрізняються. У порівнянні з Hoechst 33258, Hoechst 33342 є значно більш проникним для клітин завдяки додаванню ліпофільної етилової групи, і зазвичай його краще використовувати для фарбування живих клітин.
Приготуйте вихідний розчин барвника Hoechst розчинення вмісту одного флакона (100 мг) у 10 мл деіонізованої води (diH2O) для отримання розчину 10 мг/мл (16,23 ммоль).. Примітка: барвник Hoechst погано розчиняється у воді, тому обробіть ультразвуком, якщо необхідно, щоб розчинити.
Барвники Hoechst часто використовуються як замінники іншої фарби нуклеїнової кислоти під назвою DAPI. Ключові відмінності між барвниками Hoechst і DAPI: Барвники Hoechst менш токсичні, ніж DAPI, що забезпечує більш високу життєздатність пофарбованих клітин.