Який приклад тесту непрямої імунофлюоресценції?
Непрямий
(IFA) є напівкількісний, чутливий і швидкий тест для виявлення антитіл до імуноглобуліну M (IgM) і G (IgG) проти вірусу сказу (RABV) у зразках сироватки крові та спинномозкової рідини (ЦСР)..
Непряма імунофлюоресценція (IIF) є двоетапна серологічна техніка, в якій мічене антитіло використовується для виявлення специфічного антитіла проти антигену в сироватці крові.. З цієї причини підозрювану сироватку додають на предметне скло з полями, покритими антигеном, з подальшим додаванням специфічних мічених антитіл.
Тести на непрямі флуоресцентні антитіла (ІФА) (рис. 2) використовуються для пошуку антитіл у сироватці крові пацієнта. Наприклад, тест IFA для діагностики сифілісу використовує T. клітини pallidum, виділені від лабораторної тварини (бактерії не можна вирощувати на лабораторних середовищах), і мазок, виготовлений на предметному склі.
Існує від 5 до 6 ядерних структур непрямої імунофлюоресценції (IIF), про які зазвичай повідомляють більшість лабораторій, а саме: гомогенний, крапчастий, ядерцевий, центромерний, периферичний/облямований і проліферуючий клітинний ядерний антиген (PCNA).
Для прямого ІФ потрібні флуоресцентні антитіла з відомою специфічністю, тоді як для непрямого ІФ потрібні флуоресцентні антитіла до імуноглобуліну людини (Ig).. Субстратом, який використовується в обох методах, можуть бути зрізи тканин, культивовані клітини або навіть мікроорганізми (наприклад, Crithidia luciliae).
Процедури фарбування можна застосовувати як до внутрішньоклітинних експресованих антитіл, так і до антигенів клітинної поверхні на живих клітинах. Існує два загальних класи методів імунофлюоресценції: первинний (прямий) і вторинний (непрямий).